一、基本要求 

掌握：本章要求掌握分光光度法的特點(diǎn)、基本原理、測(cè)定方法及計(jì)算方法；分子吸收光譜與電子躍遷類(lèi)型，物質(zhì)對(duì)光的選擇吸收與吸收光譜曲線(xiàn)，摩爾吸收系數(shù)與吸收系數(shù)，吸光度與透光度，偏離朗伯-比爾定律的原因；掌握顯色反應(yīng)條件及光度測(cè)量條件的選擇；掌握紫外—可見(jiàn)分光光度計(jì)的主要部件，各部件的作用及儀器原理，主要類(lèi)型及特點(diǎn)；掌握差示分光光度法的原理、特點(diǎn)。 

理解：物質(zhì)分子結(jié)構(gòu)與紫外吸收光譜的關(guān)系，吸收波長(zhǎng)位移與分子結(jié)構(gòu)變化的關(guān)系；紫外—可見(jiàn)分光光度定量分析影響結(jié)果準(zhǔn)確度的各種因素。 

了解：了解紫外—可見(jiàn)分光光度法測(cè)定靈敏度和選擇性的途徑；雙波長(zhǎng)分光光度法等其它分光光度法定量測(cè)定的方法；紫外—可見(jiàn)分光光度法在有機(jī)化合物的結(jié)構(gòu)解析方面的作用及在其他方面的應(yīng)用。 

二、 基本概念與重點(diǎn)內(nèi)容 

A概述 

1．紫外—可見(jiàn)分光光度法的特點(diǎn) 

靈敏度與準(zhǔn)確度較高；選擇性較好；設(shè)備簡(jiǎn)單、操作簡(jiǎn)便。 

2．分光光度法的發(fā)展過(guò)程 

目視比色法 光電比色法 分光光度法 

3． 分子的紫外—可見(jiàn)吸收光譜 

分子的紫外—可見(jiàn)吸收光譜是基于物質(zhì)分子吸收紫外輻射或可見(jiàn)光，其外層電子躍遷而成，又稱(chēng)分子的電子躍遷光譜。紫外—可見(jiàn)分光光度法是基于物質(zhì)分子的紫外—可見(jiàn)吸收光譜而建立的一種定性、定量分析方法。 

4． 光的基本性質(zhì) 

5．物質(zhì)對(duì)光的吸收及吸收光譜 

6．紫外—可見(jiàn)吸收光譜與電子躍遷類(lèi)型 

7．生色團(tuán)與助色團(tuán) 

B 光的吸收定律 

1．光吸收的基本定律（朗伯-比爾定律） 

2．吸光度與透光率、百分透光率之間的關(guān)系 

3．工作曲線(xiàn)的繪制與應(yīng)用 

4．吸光系數(shù)、摩爾吸光系數(shù)和桑德?tīng)栰`敏度 

5． 偏離朗伯-比爾定律的因素 

C紫外-可見(jiàn)分光光度計(jì) 

1． 分光光度計(jì)的主要部件 

2． 在紫外和可見(jiàn)光區(qū)進(jìn)行測(cè)量時(shí)，分別選擇何種光源 

3． 單色器的主要元件 

光柵；棱鏡 

4． 分光光度計(jì)中的檢測(cè)器類(lèi)型 

早期：光電池；光電管；光電倍增管。 

5．紫外-可見(jiàn)分光光度計(jì)的類(lèi)型及特點(diǎn) 

D顯色測(cè)定試樣的制備和光度測(cè)定條件的選擇 
、 
1．顯色反應(yīng)及其影響因素 

2．測(cè)定讀數(shù)誤差和測(cè)定條件的選擇 

5．入射波長(zhǎng)的選擇 

E 分光光度定量測(cè)定方法與其他應(yīng)用 

1．單組分的測(cè)定 

通常采用 A-C 標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)法定量測(cè)定。 

2.多組分的同時(shí)測(cè)定 

3．紫外可見(jiàn)吸收光譜在有機(jī)化合物結(jié)構(gòu)解析中的作用 

了解共軛程度、空間效應(yīng)、氫鍵等；可對(duì)飽和與不飽和化合物、異構(gòu)體及構(gòu)象進(jìn)行判別。在有機(jī)化合物結(jié)構(gòu)解析中，紫外可見(jiàn)吸收光譜沒(méi)有紅外吸收光譜提供的結(jié)構(gòu)信息多。 

4．紫外—可見(jiàn)吸收光譜中有機(jī)物發(fā)色體系信息分析的一般規(guī)律